北京体彩网

今天是2020年1月10日 星期五,欢迎光临本站 

取样说明

细胞样品       组织样品       血液样品       cell-free样品        RNA提取


        一、血清样品

       1、采血后,轻轻将全血滴入洁净的EP管或者离心管;
       2、4℃静置 3~4 h,可见血块析出;
       3、5000 rpm,4℃离心 10 min,可见淡黄色血清,取出上清后可再3000 rpm,4℃离心 10 min;以最大程度保证血清质量;

       4、将血清分装,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输。


       二、血浆样品

       1、用采血针和抗凝管(含 EDTA 或柠檬酸钠)抽取全血,混匀;
       2、4℃静置 3~4 h,5000 rpm,4℃离心5 min,取上清即为血浆;
       3、可将血浆分装,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输。

       三、细胞上清液样品

       1、培养皿的细胞汇合率达到 80%~90%;
       2、把原有培养基吸掉,加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞)进行消化;
       3、细胞变圆后加入等体积的含正常血清培养基终止消化;
       4、用移液枪吹打细胞,使细胞悬浮;1100rpm,离心5min;
       5、吸掉上清液,用无 exosome 血清的培养基清洗细胞一次; 1100rpm,离心5min ;
       6、吸掉上清液,加入无 exosome 血清的培养基,悬浮细胞;   
       7、根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中(收集上清时细胞汇合率为 60%~80%),培养48h~72h 后,收集细胞上清;
       8、2000 rpm,离心10min,然后10000 rpm,离心30min,去除细胞或者细胞碎片,取上清;
       9、分装,液氮速冻,-80℃保存。

       四、注意事项

       1、送样量:血清/血浆>4ml,细胞培养上清液>10ml。
       2、血浆样品不能用肝素抗凝,会影响total RNA的抽提效果。

在线咨询
咨询QQ咨询QQ
咨询电话:
400-966-5216

请扫描二维码添加客服微信

公众号

[向上]
网易彩票-Welcome 河南快三-HOME 安徽彩票-Welcome 分分十一选五-Welcome 安徽11选5-官方推荐 新疆11选5-北京体彩网